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本生帶您了解—ELISA實驗18點操作要素
更新時間:2023-03-23瀏覽:1014次

  ELISA實驗操作要點


  每個實驗都有自己的規(guī)則以及注意點,elisa實驗也不例外,對于elisa實驗如此條件嚴格的,那么如何才能保障elisa實驗的正常進行呢,下面本生生物操作人員的技術要求,的確是如此,下面就是elisa實驗時索要注意的問題。

  ELISA實驗操作18條要點:

  1、要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M行確定。但hao有專業(yè)人員進行矯正。

  2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。

  3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。

  4、實驗時,要使底物避光保存。

  5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。

  6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。

  7、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。

  8、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

  9、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。

  10、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。

  11、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

  12、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。

  13、檢測前,要打開酶標儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。

  14、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。

  15、待檢樣品要澄清,否則會影響結(jié)果。

  16、溫浴時間應遵守試劑盒規(guī)定。

  17、應盡量做雙孔實驗,這樣才能保證數(shù)據(jù)的準確性。

  18、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。

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