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　　以下是關(guān)于?人觸珠蛋白相關(guān)蛋白(HPR)ELISA試劑盒?的實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明，綜合整理自多份高可信度操作手冊(cè)及技術(shù)文檔?：

　　BS-1737 人觸珠蛋白相關(guān)蛋白(HPR)ELISA試劑盒

　　一、檢測(cè)原理?

　　采用?雙抗體夾心法?：

　　抗HPR單抗預(yù)包被于酶標(biāo)板，樣本中的HPR與單抗結(jié)合?。

　　加入生物素化抗HPR抗體形成復(fù)合物，洗滌后結(jié)合辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記鏈霉親和素?。

　　加入TMB顯色底物，OD450nm吸光度值與HPR濃度呈正比，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)定量?。

　　二、試劑盒組成?

　　組分 規(guī)格(96T) 保存條件

　　預(yù)包被酶標(biāo)板 8×12孔 4℃/-20℃干燥

　　凍干標(biāo)準(zhǔn)品 2支(2000pg/ml) -20℃

　　生物素化抗體 120μL 4℃(避光)

　　TMB顯色液 A/B液各6mL 4℃(避光)

　　終止液(2M) 6mL 室溫避光

　　20×濃縮洗滌液 50mL 室溫

　　注：不同品牌組分可能略有差異，需核對(duì)實(shí)際包裝?。

　　三、樣本處理?

　　血清/血漿?：

　　全血室溫靜置2小時(shí)或4℃過(guò)夜，1000×g離心20分鐘取上清?。

　　避免溶血或高血脂樣本?。

　　組織勻漿?：

　　用預(yù)冷PBS(pH7.4)沖洗組織，按1:9(重量/體積)勻漿后離心取上清?。

　　細(xì)胞培養(yǎng)上清?：

　　1000×g離心20分鐘去除碎片?。

　　保存條件?：

　　短期(1周內(nèi))可4℃保存，長(zhǎng)期需分裝凍存于-20℃或-80℃，避免反復(fù)凍融?。

　　四、操作步驟?

　　試劑準(zhǔn)備?：

　　標(biāo)準(zhǔn)品：用400μL蒸餾水復(fù)溶，梯度稀釋(建議做復(fù)孔)?。

　　洗滌液：20×濃縮液按1:20稀釋?。

　　加樣與孵育?：

　　每孔加入50μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，室溫孵育2小時(shí)?。

　　顯色與終止?：

　　加入TMB底物避光顯色10-15分鐘，終止后30分鐘內(nèi)檢測(cè)OD值?。

　　五、注意事項(xiàng)?

　　避免酶標(biāo)板底部接觸，影響讀數(shù)準(zhǔn)確性?。

　　不同批號(hào)試劑不可混用，未用完板條需密封防潮?。

　　終止液含強(qiáng)酸，操作時(shí)需佩戴防護(hù)用具?。

　　注：以上資料僅供參考，如需進(jìn)一步技術(shù)細(xì)節(jié)或問(wèn)題排查，可參考具體品牌說(shuō)明書(shū)或聯(lián)系供應(yīng)商?。

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