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以下是為您整理的犬白介素18(IL-18)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū),內(nèi)容涵蓋實(shí)驗(yàn)原理、操作流程及注意事項(xiàng)。
犬白介素18(IL-18)ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法原理進(jìn)行檢測(cè)。其核心機(jī)制是通過(guò)特異性抗體與目標(biāo)抗原的結(jié)合反應(yīng)實(shí)現(xiàn)定量分析。具體過(guò)程包括:首先將抗犬IL-18的捕獲抗體包被于微孔板表面形成固相載體;隨后加入待測(cè)樣本,樣本中的IL-18會(huì)與固相抗體特異性結(jié)合;再加入酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物;最后通過(guò)底物顯色反應(yīng)(如TMB),在HRP酶催化下產(chǎn)生顏色變化,其顯色強(qiáng)度與樣本中IL-18濃度呈正相關(guān)。該技術(shù)具有高靈敏度(可檢測(cè)pg/mL級(jí)別蛋白)和強(qiáng)特異性(雙抗體設(shè)計(jì)有效排除交叉反應(yīng))的特點(diǎn),適用于血清、血漿、組織勻漿等多種樣本中IL-18的精準(zhǔn)定量。
BS-4413 犬白介素18(IL-18)ELISA試劑盒
實(shí)驗(yàn)操作流程?
樣本準(zhǔn)備?
血清/血漿?:使用無(wú)熱原試管采集,EDTA或肝素抗凝,3000 rpm離心10分鐘取上清。
組織勻漿?:按重量加入PBS(pH 7.4)勻漿,3000 rpm離心10分鐘取上清。
保存條件?:短期(48小時(shí)內(nèi))2-8℃保存,長(zhǎng)期需-20℃分裝,避免反復(fù)凍融。
試劑配制?
洗滌液?:濃縮洗滌液按1:20比例用蒸餾水稀釋。
標(biāo)準(zhǔn)品?:用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液梯度稀釋(如125-8000 pg/mL范圍)。
檢測(cè)步驟?
加樣?:每孔加入50μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,37℃孵育30分鐘。
洗滌?:棄去液體,用洗滌液洗板5次,拍干。
酶標(biāo)抗體?:每孔加入50μL酶標(biāo)檢測(cè)抗體,37℃孵育30分鐘。
顯色?:加入TMB底物液50μL,避光孵育15分鐘。
終止?:每孔加入50μL終止液,立即測(cè)定OD值(450nm)。
結(jié)果計(jì)算?
通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合,根據(jù)樣本OD值計(jì)算IL-18濃度。
注意事項(xiàng)?
儀器要求?:需配備450nm酶標(biāo)儀及精準(zhǔn)加樣器(0.5-1000μL)。
操作規(guī)范?:避免氣泡干擾,孵育時(shí)用封板膜密封微孔。
質(zhì)控建議?:每批次實(shí)驗(yàn)需設(shè)置空白孔和重復(fù)孔以確保數(shù)據(jù)可靠性。
以上內(nèi)容詳細(xì)說(shuō)明了犬IL-18 ELISA試劑盒的操作規(guī)范,如需進(jìn)一步優(yōu)化實(shí)驗(yàn)方案或補(bǔ)充其他物種的檢測(cè)方法,可提供具體需求。
注意:以上僅供參考,實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循試劑盒說(shuō)明書(shū),避免交叉污染,并確保樣本處理(如離心、稀釋)符合要求?。
植物B-香樹(shù)合酶(B-AS) ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。
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