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小鼠CD206分子(CD206)ELISA試劑盒實驗使用說明書
BS-9397 小鼠CD206分子(CD206)ELISA試劑盒
一、試劑盒基本信息
檢測原理
采用雙抗體夾心法:預包被抗CD206抗體的微孔板與樣本中的靶標結(jié)合后,加入生物素化二抗及SABC復合物,經(jīng)TMB顯色后測定450nm吸光度,濃度與OD值呈正比。
組分清單
預包被酶標板(8×12孔)
標準品(0.312-20ng/mL,需現(xiàn)配現(xiàn)用)
生物素化檢測抗體(100×濃縮液)
TMB顯色液(A/B組分,避光保存)
20×濃縮洗滌液(含防腐劑)
終止液(2M硫酸)
二、實驗操作步驟
1. 樣本準備
血清/血漿:采集后3000rpm離心10分鐘,2-8℃保存≤48小時,長期需-80℃凍存(避免反復凍融)。
組織勻漿:按1:9比例加入PBS勻漿,4℃離心取上清。
2. 檢測流程
加樣:每孔加入100μL標準品或樣本(建議復孔),37℃孵育90分鐘。
洗滌:用1×洗滌液洗板5次,拍干。
加抗體:每孔加入100μL生物素化抗體(1:100稀釋),37℃孵育60分鐘。
顯色:加入TMB底物避光反應15分鐘,終止液終止反應。
三、注意事項
時間控制:首尾孔加樣間隔≤30分鐘,避免預孵育時間差異。
試劑保存:標準品需-20℃保存,濃縮洗滌液使用前需37℃助溶。
數(shù)據(jù)有效性:標準曲線R2應≥0.95,樣本OD值需落在標準曲線范圍內(nèi)。
四、結(jié)果計算
以標準品濃度(ng/mL)為橫坐標,OD值為縱坐標繪制曲線,擬合四參數(shù)方程計算樣本濃度。
注:以上資料僅供參考,不作為實際數(shù)據(jù),如需具體產(chǎn)品資料請咨詢技術老師或品牌商。
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