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大鼠成纖維細胞生長因子受體1(FGFR1)ELISA試劑盒實驗使用說明書
BS-8510 成纖維細胞生長因子受體1(FGFR1)ELISA試劑盒
有效期:6個月(4℃避光保存)
一、試劑盒組成
預包被酶標板:96孔/48孔,包被抗大鼠FGFR1單抗。
標準品:6個濃度梯度(0-1000 pg/mL),凍干粉需復溶。
生物素化檢測抗體:HRP標記,30倍濃縮液(0.4 mL)。
顯色系統(tǒng):TMB底物液(15 mL)、終止液(2M H?SO?,15 mL)。
輔助試劑:洗滌緩沖液(30×濃縮液)、樣本稀釋液(含1% BSA)。
二、實驗流程
樣本準備
血清/血漿:采集后3000×g離心10分鐘,避免溶血。
組織勻漿:按1:9(w/v)加入PBS勻漿,離心取上清。
細胞上清:直接檢測或離心去除碎片。
保存:短期4℃(≤48小時),長期-80℃(避免反復凍融)。
檢測步驟
加樣:標準品/樣本各100μL/孔,37℃孵育90分鐘。
洗滌:洗滌緩沖液(1:20稀釋)洗板3次,拍干。
加抗體:生物素化抗體100μL/孔,37℃孵育60分鐘。
顯色:TMB底物液100μL/孔,避光反應15分鐘,終止液50μL/孔。
讀數(shù):450nm波長測OD值,繪制標準曲線計算濃度。
三、注意事項
交叉反應:本試劑盒特異性針對大鼠FGFR1,與人源FGFR1交叉反應率<5%。
靈敏度:檢測下限為15 pg/mL,線性范圍50-1000 pg/mL。
干擾因素:避免高脂或溶血樣本,建議稀釋后復測。
質量控制:每板需設空白孔、標準品復孔,CV值應<10%。
四、數(shù)據(jù)示例
標準品濃度 (pg/mL)OD450均值
00.05
500.32
1000.67
擬合曲線:建議采用四參數(shù)邏輯回歸(4PL)模型。
五、技術支持
問題排查:若OD值異常,檢查洗滌步驟或底物避光性。
定制服務:可提供大鼠FGFR1重組蛋白(15kDa)作為陽性對照
注:以上僅供參考,不作為實際數(shù)據(jù),實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。 Elisa試劑盒
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